
有機(jī)合成是構(gòu)建復(fù)雜有機(jī)分子、制備功能化合物的關(guān)鍵技術(shù),而光譜分析(如紫外-可見光譜、紅外光譜)作為有機(jī)合成產(chǎn)物表征的核心手段,能夠快速獲取化合物的官能團(tuán)信息、濃度分布及反應(yīng)進(jìn)程等關(guān)鍵數(shù)據(jù)。然而,光譜分析結(jié)果的準(zhǔn)確性高度依賴樣品制備過程的規(guī)范性,其中試劑移取、樣品稀釋、反應(yīng)體系配比等步驟的體積精度是核心影響因素。若移液過程存在偏差,易導(dǎo)致樣品濃度偏離真實值,引發(fā)光譜特征峰強(qiáng)度異常、基線波動等問題,進(jìn)而干擾產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定與含量計算。
一、實驗部分
(一)實驗材料與儀器
1、試劑
無水乙醇;乙酸乙酯;苯乙酮;鹽酸羥胺;N,N-二甲基甲酰胺;去離子水。
2、儀器
博清生物單道移液器;對照移液器;紫外-可見分光光度計;傅里葉變換紅外光譜儀;電子分析天平。
(二)實驗方法
1、博清生物單道移液器移液準(zhǔn)確性驗證
采用“重量法”驗證移液器準(zhǔn)確性:在(25±1)℃環(huán)境下,分別使用博清生物單道移液器及對照移液器,移取去離子水至已去皮的電子分析天平上,記錄移取液體的質(zhì)量(m)。根據(jù)水的密度計算實際移液體積,并與設(shè)定體積對比,計算體積誤差。每種量程下重復(fù)測定10次,計算平均值與相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
2、有機(jī)合成樣品制備與光譜分析
以“苯乙酮肟化反應(yīng)”為例,開展樣品制備與光譜分析實驗:
反應(yīng)體系配制:使用博清生物移液器移取0.5mL苯乙酮至反應(yīng)管中,再用移液器移取2.0mL鹽酸羥胺溶液,最后用移液器移取0.1mL吡啶(催化劑),搖勻后在 60℃水浴中反應(yīng)1h,得到苯乙酮肟粗產(chǎn)物。
樣品稀釋:取上述反應(yīng)液0.5mL,使用移液器移至10mL容量瓶中,用乙醇定容至刻度,制備成用于紫外-可見光譜分析的樣品;另取反應(yīng)液1.0mL,經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮后,用移液器移取50μL樣品涂覆于KBr壓片上,制備紅外光譜分析樣品。
光譜測試:紫外-可見光譜測試條件為波長范圍200-400nm,掃描速度中速,狹縫寬度2nm;紅外光譜測試條件為波數(shù)范圍4000-400cm?1,分辨率4cm?1,掃描次數(shù)32次。使用對照移液器重復(fù)上述樣品制備與測試過程,對比兩種移液器制備樣品的光譜數(shù)據(jù)差異。
3、重復(fù)性與穩(wěn)定性測試
選取3名實驗人員,分別使用博清生物單道移液器按照上述方法制備苯乙酮肟樣品,每人重復(fù)制備5份,進(jìn)行紫外-可見光譜測試,記錄特征吸收峰的吸光度值,計算組內(nèi)RSD與組間RSD,評估移液器操作的重復(fù)性與穩(wěn)定性。
二、結(jié)果與討論
(一)移液準(zhǔn)確性與重復(fù)性
博清生物單道移液器在各量程下的體積誤差均≤±0.5%,RSD≤0.8%,顯著優(yōu)于對照移液器。這一結(jié)果得益于博清移液器采用的“雙活塞補(bǔ)償技術(shù)”,可有效抵消有機(jī)試劑揮發(fā)性導(dǎo)致的壓力變化,同時高精度陶瓷活塞與耐腐蝕涂層(PTFE)的搭配,避免了試劑對移液部件的侵蝕,保障了長期使用的準(zhǔn)確性。
(二)光譜分析結(jié)果對比
1、紫外 - 可見光譜
博清移液器制備樣品在245nm處的特征吸收峰吸光度值為0.623,且3次平行測試的RSD為0.45%;而對照移液器制備樣品的吸光度值為0.587-0.631,RSD達(dá)1.82%。吸光度值的波動源于對照移液器移液誤差導(dǎo)致的樣品濃度差異,而博清移液器的精準(zhǔn)控量有效降低了濃度波動,使光譜數(shù)據(jù)更穩(wěn)定。此外,博清移液器制備樣品的基線平直度優(yōu)于對照樣品,進(jìn)一步證明其在樣品制備過程中減少了雜質(zhì)引入或試劑殘留的干擾。
2、紅外光譜
苯乙酮肟的紅外特征峰為:3280cm?1、1650 cm?1、1370 cm?1。博清移液器制備樣品的紅外光譜中,上述特征峰的峰形尖銳、峰位準(zhǔn)確,且峰強(qiáng)度的RSD為0.38%;對照移液器制備樣品的特征峰峰位偏移±2-3cm?1,峰強(qiáng)度RSD達(dá)1.56%。峰位偏移與強(qiáng)度波動主要因?qū)φ找埔浩饕迫〈呋瘎w積誤差,導(dǎo)致反應(yīng)不完全,產(chǎn)物中殘留微量苯乙酮,而博清移液器的精準(zhǔn)配比如實反映了反應(yīng)的真實進(jìn)程,保障了紅外光譜對產(chǎn)物結(jié)構(gòu)鑒定的可靠性。
(三)重復(fù)性與穩(wěn)定性測試
3名實驗人員使用博清移液器制備苯乙酮肟樣品的紫外-可見光譜數(shù)據(jù)顯示,組內(nèi)RSD(同一人員5次重復(fù))為0.42%-0.58%,組間 RSD(3人數(shù)據(jù))為0.65%,均顯著低于對照移液器的組內(nèi)RSD(1.21%-1.93%)與組間RSD(2.15%)。這一結(jié)果表明,博清移液器的“人體工學(xué)設(shè)計”(如防滑握把、輕觸式按鈕)降低了操作疲勞度,同時清晰的量程刻度與“量程鎖定功能”減少了人為操作失誤,使不同操作人員的移液一致性得到提升,進(jìn)一步保障了樣品制備的重復(fù)性。
三、結(jié)論
本研究系統(tǒng)探究了博清生物單道移液器在有機(jī)合成光譜分析樣品制備中的應(yīng)用性能,得出以下結(jié)論:
(一)博清生物單道移液器在各量程下的移液準(zhǔn)確性(誤差≤±0.5%)與重復(fù)性(RSD≤0.8%)均優(yōu)于傳統(tǒng)移液器,可滿足有機(jī)合成中易揮發(fā)、腐蝕性試劑的精準(zhǔn)移取需求;
(二)該移液器制備的樣品在紫外-可見光譜與紅外光譜分析中,展現(xiàn)出更穩(wěn)定的吸光度值、更準(zhǔn)確的特征峰位及更低的強(qiáng)度波動,有效提升了光譜數(shù)據(jù)的可靠性與重復(fù)性;
(三)其人體工學(xué)設(shè)計與操作便捷性,降低了人為操作誤差,適合多人員協(xié)作的實驗室場景。
博清生物單道移液器為有機(jī)合成與分析中光譜分析樣品制備提供了高效、精準(zhǔn)的工具支持,可廣泛應(yīng)用于有機(jī)化學(xué)科研、醫(yī)藥中間體分析、精細(xì)化工產(chǎn)品檢測等領(lǐng)域,對推動有機(jī)合成分析技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化具有重要意義。未來可進(jìn)一步探究其在微量有機(jī)樣品(μL級)制備及在線光譜分析聯(lián)用中的應(yīng)用潛力。
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